مطالعه چندشکلی تک‌نوکلئوتیدی ژن لاکتوفرین و ارتباط آن با تعداد سلول‌های سوماتیک شیر گاوهای دورگ استان گیلان

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 دانش آموخته کارشناسی ارشد گروه علوم دامی دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان

2 استادیار گروه علوم دامی دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان

3 استاد گروه علوم دامی دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان

4 دانشیار گروه علوم دامی دانشکده علوم کشاورزی دانشگاه گیلان

چکیده

درحالی که تعداد گاوهای اصیل در استان گیلان نسبت به سایر استان‌ها کم بوده، جمعیت گاوهای دورگ در حال افزایش است. لاکتوفرین به عنوان یکی از ژن‌های مطرح در ایجاد مقاومت به ورم پستان، نقشی اساسی در مکانیسم دفاعی غدد پستان گاو دارد. لذا در این مطالعه چندشکلی یک جایگاه جهشی شناخته شده در اینترون 6 ژن لاکتوفرین و اثر آن بر تعداد سلول‌های سوماتیک شیر100 راس گاو دورگ نسل اول جفتگیری گاو ماده بومی استان گیلان با گاوهای نر هلشتاین بررسی شد. محصول PCR یک قطعه 301 جفت بازی است که در اثر هضم با آنزیم EcoRI سه ژنوتیپ شامل AA (301)، BB (201 و 100) و AB (301 و 201 و 100) ایجاد می‌کند. هر سه ژنوتیپ در گاوهای آمیخته استان گیلان شناسایی شد. فراوانی ژنوتیپی مشاهده شده برای ژنوتیپ‌های AA، BB و AB به ترتیب برابر با 41، 2 و 57% بودند که انحراف معنی‌داری را از حالت تعادل هاردی-واینبرگ نشان داد (01/0P<)؛ به علاوه هتروزایگوسیته مشاهده شده از مقدار مورد انتظار نیز تفاوت زیادی داشت. فراوانی آللی a و b به ترتیب 5/69 و 5/30% و تعداد آلل مؤثر و شاخص شانون نیز به ترتیب 74/1 و 62/0 بودند. متوسط تعداد سلول‌های سوماتیک در شیر گاوهای دورگ 103×261 در میلی‌لیتر شیر بود. تفاوت لگاریتم تعداد سلول‌های ‌سوماتیک ژنوتیپ­های AB، AA و BB معنی­دار نبود (05/0<P). با توجه به وفور کم ژنوتیپ BB به سختی بتوان یکی از دو آلل ژن لاکتوفرین را به عنوان نشانگر مقاومت به ورم پستان معرفی کرد.

کلیدواژه‌ها


عنوان مقاله [English]

Study of Lactoferrin gene single nucleotide polymorphism and its relation with milk somatic cells in crossbred cows of Guilan province

نویسندگان [English]

  • M. Ayatollahi 1
  • S. H. Hosseini Moghaddam 2
  • S. Z. Mirhosseini 3
  • N. Ghavi Hossein-Zadeh 4
1 M.Sc. Student, Department of Animal Science, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran
2 Assistant Professor, Department of Animal Science, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran
3 Professor, Department of Animal Science, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran
4 Associate Professor, Department of Animal Science, Faculty of Agricultural Sciences, University of Guilan, Rasht, Iran
چکیده [English]

Although Guilan province’s purebred cattle is low despite other regions, but crossbred cattle population are increasing.  Lactoferrin as a major mastitis resistant gene has substantial roles in dairy cattle’s udder tissue immune mechanisms. So, the effect of a known SNP on SCC of 100 crossbred cows with 50 percent father Holstein blood was studied in intron 6 of Lactoferrin gene. PCR product was a 301bp fragment that EcoR1 digestion produced three genotype including AA (301 bp), BB (201 and 100 bp) and AB (301, 201 and 100 bp). All three genotypes have been identified in the crossbred cows. Genotypes frequencies for AA, BB and AB were 41, 2 and 57%, that showed significant deviation from Hardy-Weinberg equilibrium (P˂0.01). Also, observed and expected heterozygosity was highly different. Frequency of A and B alleles were 69.5 and 30.5%, respectively and effective number of alleles (Ne) and Shannon’s index(I) were 1.74 and 0.62. Average SCC was 261×103 per mL.Differences of SCS ofAB, AA and BB genotypes were not significant (P˂0.05). It is difficult to introduce A or B allele as marker for mastitis resistance, due to low frequency of BB genotype.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Polymorphism
  • Milk somatic cells
  • Crossbred cow
  • Lactoferrin gene
  • Mastitis
Asadallahpor Nanaei H., Edriss M. A., Ansari Mahyari S., Rahmani H. R. and Sayed Tabatabaei B. E. 2012. Lactoferrin gene polymorphism of Holstein cows in Isfahan province. Annals of Biological Research, 3: 2365-2367.
Chaneton L., Tirante L., Maito J., Chaves J. and Bussmann L. E. 2008. Relationship between milk lactoferrin and etiological agent in the mastitic bovine mammary gland. Journal of Dairy Science, 91: 1865-1873.
Elbers A. R. W., Miltenburg J. D., De Lange D., Crauwels A. P. P., Barkema H. W. and Schukken Y. H. 1998. Risk factors for clinical mastitis in a random sample of dairy herds from the southern part of the Netherlands. Journal of Dairy Science, 81: 420-426.
Emanuelson U., Danell B. and Philipsson J. 1988. Genetic parameters for clinical mastitis, somatic cell counts, and milk production estimated by multiple-trait restricted maximum likelihood. Journal of Dairy Science, 71: 467–476.
Kelm S., Pelz A., Schauer R., Filbin M. T., Tang S., De Bellard M. E., Schnaar R. L., Mahoney J. A., Hartnell A., Bradfield  P. and Crocker P. R. 1994. Sialoadhesin, myelin-associated glycoprotein and CD22 define a new family of sialic acid-dependent adhesion molecules of the immunoglobulin superfamily. Current Biology, 4: 965-972.
Kutila T. 2004. Role of lactoferrin in treatment of bovine mastitis. Ph.D. dissertation, University of Helsinki, Finland, 57.
Martins A. M., Silvestre A. M., Petim-Batista M. F. and Colaço J. A. 2011. Somatic cell score genetic parameter estimates of dairy cattle in Portugal using fractional polynomials. Journal Animal Science, 89: 1281-1285.
Miller S. A., Dykes D. D. and Polesky H. F. 1988. A simple salting out procedure for extracting DNA from human nucleated cells. Nucleic Acid Research, 16: 1215.
SAS: Statistical Analysis System for Windows (Release 9.1). 2002. SAS Institute Inc., Raleigh, North Carolina, USA.

Schwerin M., Solinas-Toldo S., Eggen A., Brunner R., Seyfert H. M. and Fries R. 1994. The bovine lactoferrin gene (LTF) maps to chromosome 22 and syntenic group U12. Mammalian Genome, 5: 486-9.

Sender G., Korwin-kossakowska A., Galal K. and Prusak B. 2006. Ocenawpływupolimorfizmuwybranychgenównawystępowanie mastitis u krów. MedycynaWeterynaryjna, 62: 563-565.

Seyfert H. M. and Kuhn C. 1994. Characterization of a first bovine lactoferrin gene variant, based on an EcoRI polymorphism. Animal Genetics, 25: 54.

Seyfert H. M., Tuckoricz A., Interthal H., Koczan D. and Hobom G. 1994. Structure of the bovine lactoferrin-encoding gene and its promoter. Gene, 143: 265-269.
Sharifzadeh A. and Doosti A. 2011. Study of lactoferrin gene polymorphism in Iranian Holstein cattle using PCR-RFLP technique. Global Veterinary, 6: 530-536.
Wojdak-Maksymiec K., Kmiec M. and Ziemak J. 2006. Associations between bovine lactoferrin gene polymorphism and somatic cell count in milk. Veterinary Medicine, 51: 14-20.
Zhao, C. H., He G. M., Wang Y. L. and Zhang Z. 2008. Polymorphism analysis of the promoter of cow Lactoferrin gene with PCR-RFLP and its correlation with subclinical mastitis. Acta Agriculturae Slovenica, 92: 185–187.